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Avaliação de três métodos de extração de DNA de material parafinado para amplificação de DNA genômico pela técnica da PCR

Ricardo Alves Mesquita Evelyn K Anzai; Rogério Nogueira de Oliveira; Fábio Daumas Nunes

Pesquisa Odontológica Brasileira v. 15, n. 4, p. 314-319, out./dez. 2001

São Paulo 2001

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  • Título:
    Avaliação de três métodos de extração de DNA de material parafinado para amplificação de DNA genômico pela técnica da PCR
  • Autor: Ricardo Alves Mesquita
  • Evelyn K Anzai; Rogério Nogueira de Oliveira; Fábio Daumas Nunes
  • Assuntos: DNA; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE; AMPLIFICAÇÃO DE GENES
  • É parte de: Pesquisa Odontológica Brasileira v. 15, n. 4, p. 314-319, out./dez. 2001
  • Descrição: Existem na literatura vários protocolos para extração de DNA genômico a partir de material fixado em formol e embebido em parafina. A obtenção de DNA genômico é importante para realização de experimentos em biologia molecular, dentre eles a PCR. Este trabalho teve por objetivo otimizar a extração de DNA genômico a partir de material fixado (hiperplasia fibrosa inflamatória) e não-fixado (mucosa bucal normal) em formol, comparando-se três metodologias diferentes: fenol com digestão enzimática, partículas de sílica com e sem digestão enzimática. Para amplificação do DNA pela técnica da PCR, utilizou-se iniciadores para o éxon 7 da citoqueratina humana tipo 14. O sucesso da amplificação foi verificado pela eletroforese do produto em gel de poliacrilamida 8% contendo glicerol 5% corado com prata. Obteve-se amplificação do DNA genômico extraído com fenol/digestão enzimática e com partículas de sílica/digestão enzimática, para ambos tecidos utilizados. O método padronizado tem potencial para auxiliar no diagnóstico histopatológico, assim como no estudo retrospectivo de material de arquivo
  • Editor: São Paulo
  • Data de criação/publicação: 2001
  • Formato: p. 314-319.
  • Idioma: Português
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