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Investigação de mecanismos e elementos envolvidos no processo de regulação de expressão gênica em Leishmania

Mônica Cristina Terrão Angela Kaysel Cruz

2012

Localização: FMRP - Fac. Medicina de Ribeirão Preto    (Terrão, Mônica Cristina )(Acessar)

  • Título:
    Investigação de mecanismos e elementos envolvidos no processo de regulação de expressão gênica em Leishmania
  • Autor: Mônica Cristina Terrão
  • Angela Kaysel Cruz
  • Assuntos: LEISHMANIA; REGULAÇÃO GÊNICA
  • Notas: Tese (Doutorado)
  • Descrição: Protozoários do gênero Leishmania são responsáveis pelas leishmanioses e como eucariotos ancestrais são importantes organismos-modelo. Exibem características biológicas e processos moleculares incomuns entre os eucariotos como trans-splicing, transcrição policistrônica, e regulação da expressão gênica predominantemente pós-transcricional. De fato, os dados disponíveis indicam que os genes têm sua expressão regulada por um conjunto de estratégias como o transporte seletivo para o citoplasma, controle diferencial da estabilidade dos mRNAs e da taxa de iniciação de tradução ou do processamento, direcionamento ou degradação dirigida das proteínas. Os estudos sobre controle de expressão gênica em tripanossomatídeos, em grande parte, concentram-se em investigar o papel de regiões 3' não traduzidas (3' UTR), que associadas a proteínas, modulam a expressão gênica participando da seleção das sequências de RNA mensageiro a serem traduzidas. Como é alta a divergência de sequências nas regiões genômicas não codificadoras nos genomas de diferentes espécies de Leishmania, é provável que a conservação de sequências nessas regiões ocorram por pressão seletiva e atribui-se a elas potencial relevância funcional. Por isso, em nosso laboratório, Elton Vasconcelos construiu um banco de dados contendo as sequências conservadas (CICS) contidas entre as CDSs anotadas do genoma de L. braziliensis, L. infantum e L. major. O objetivo deste trabalho foi investigar o papel funcional destes CICS na regulação da expressão gênica. Para isso analisamos possíveis interações entre o CICS e proteínas do parasita por EMSA e Pull-down e utilizamos um gene repórter (NEO) para monitorar a relevância dos CICS sobre a modulação da expressão no contexto genômico original e em lócus de expressão constitutiva. Pudemos identificar 13 proteínas ligantes em oito CICS investigados, resultado sugestivo do
    papel regulatório destes CICS e que criou a possibilidade de investigar essas proteínas para ampliar a compreensão da maquinaria de controle de expressão gênica neste parasita. Foram criadas as ferramentas para investigação funcional de dois CICS que são comuns a transcritos de conjuntos de genes que se comportam como regulons transcricionais. Por fim, estão em andamento as análises funcionais dos transfectantes de Leishmania que permitirão compreender o papel dos CICS na modulação dos níveis de expressão dos genes ao longo do processo de diferenciação de promastigota metacíclico a amastigota
  • Data de criação/publicação: 2012
  • Formato: 93 p anexos.
  • Idioma: Português
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