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Identificação e análise de expressão de RNAs intrônicos não codificadores humanos

Nakaya, Helder Takashi Imoto

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Química 2007-03-09

Acesso online. A biblioteca também possui exemplares impressos.

  • Título:
    Identificação e análise de expressão de RNAs intrônicos não codificadores humanos
  • Autor: Nakaya, Helder Takashi Imoto
  • Orientador: Verjovski-Almeida, Sérgio
  • Assuntos: Alfa- Amanitina; Transcriptoma; Splicing Alternativo; Rna; Andrógeno; Expressão Gênica; Genomas; Microarrays; Androgen; Alternative Splicing; Alpha-Amanitin; Transcriptome
  • Notas: Tese (Doutorado)
  • Notas Locais: No CQ a tese acompanha o CD-ROM
  • Descrição: Neste trabalho, nós mostramos estudos em larga-escala de RNAs não codificadores antisenso que são transcritos em regiões intrônicas de genes humanos. Alguns destes transcritos intrônicos possuem níveis de expressão correlacionados ao grau de diferenciação tumoral de câncer de próstata, apontando para uma relevância biológica destas mensagens em doenças complexas como o câncer. Nós também avaliamos a existência de um mecanismo comum de regulação de transcrição, compartilhado por mRNAs codificadores de proteína e RNAs intrônicos, através de análises de perfis de expressão de uma linhagem tumoral de próstata estimulada por andrógeno. A análise de ESTs e mRNAs depositados em bancos públicos de seqüências revelou mais de 55 mil RNAs Totalmente Intrônicos Não-codificadores (TIN), transcritos dos íntrons de 74% de todos os genes RefSeq únicos. Guiados por esta informação, nós desenhamos uma plataforma de oligonucleotídeos contendo sondas senso e antisenso para cada um de 7.520 transcritos TIN selecionados aleatoriamente, além de sondas para os genes codificadores de proteína correspondentes. Nós identificamos assinaturas intrônicas e exônicas de expressão tecido-específicas em fígado, próstata e rim. Os RNAs TIN antisenso mais altamente expressos eram transcritos de íntrons de genes codificadores de proteína enriquecidos na categoria ?Regulação da transcrição?. A inibição da RNA Polimerase II resultou num aumento de expressão de uma fração dos RNAs intrônicos em células em cultura, sugerindo que outras RNA Polimerases possam estar envolvidas em sua biossíntese. Um subconjunto das assinaturas intrônicas e exônicas localizadas nos mesmos loci genômicos possuíram padrões de expressão correlacionados, sugerindo que RNAs intrônicos regulem a abundância ou o padrão de uso de éxons de mensagens codificadoras de proteína. Nós identificamos diversos padrões de expressão de RNAs intrônicos, indicando que eles possam ter papéis regulatórios. Esta estratégia orientada pelo gene, que combina um microarray intrônico/exônico deve permitir análises comparativas futuras de transcrição intrônica sob várias condições fisiológicas e patológicas, avançando assim em nosso conhecimento sobre as funções biológicas destes RNAs não codificadores.
  • DOI: 10.11606/T.46.2007.tde-08052007-144816
  • Editor: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Química
  • Data de criação/publicação: 2007-03-09
  • Formato: Adobe PDF
  • Idioma: Português
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