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Transferrina da retina de coelhos estudo bioquímico e imunohistoquímico

Maria Laura Pinto Rodrigues Eduardo Miguel Laicine

2002

Localização: FMRP - Fac. Medicina de Ribeirão Preto    (Rodrigues, Maria Laura Pinto )(Acessar)

  • Título:
    Transferrina da retina de coelhos estudo bioquímico e imunohistoquímico
  • Autor: Maria Laura Pinto Rodrigues
  • Eduardo Miguel Laicine
  • Assuntos: BIOLOGIA MOLECULAR
  • Notas: Tese (Doutorado)
  • Descrição: O objetivo deste estudo foi verificar o papel da retina neural de coelho como fonte de transferrina para o vítreo. Explantes de retina neural foram cultivados na presença de 35S-metionina e os extratos dos explantes e dos meios de incubação foram submetidos à imunoprecipitação com o anticorpo anti-transferrina e os imunoprecipitados processados para eletroforese em gel de poliacrilamida-SDS seguidos de fIuorografia. RNAm de transferrina da retina foi examinado através da técnica de RT-PCR seguida ou não de clonagem, com posterior seqüenciamento. Além disso, retinas in toto ou cortes histológicos espessos da parede da câmara vítrea foram processados para o exame imunohistoquímico de transferrina através de microscopia confocal. Os resultados obtidos permitiram concluir que: i) a metodologia utilizada para o cultivo de explantes de corpo ciliar-íris, desenvolvida neste laboratório, mostrou-se também adequada para o cultivo de explantes de retina, possibilitando a obtenção de marcação metabólica eficiente de proteínas para cultivos de até 16 horas; ii) ocorre a síntese de uma transferrina aparentemente não secretória em porções de retina periférica desprovida de raios medulares, com peso molecular cerca de 3kDa menor que a transferrina do vítreo; iii) explantes de retina periférica orientados com os fotorreceptores voltados para o meio de cultivo sintetizam e secretam transferrina, sendo esta a primeira evidência de secreção de transferrina por explantes de retina;
    iv) as regiões centrais da retina sintetizam e secretam transferrina, provavelmente à custa de astrócitos localizados junto aos vasos sanguíneos presentes nesta região; v) o RNAm de transferrina de retina periférica não apresentou diferenças estruturais significativas em relação ao RNAm de transferrina de fígado, a não ser por uma trinca de nucleotídeos a mais, ao que tudo indica, sem repercussões na estrutura e no destino celular desta proteína. ) Portanto, não foram encontradas alterações estruturais na mensagem que pudessem explicar a diferença de peso molecular detectada, pelo menos quanto as regiões do RNAm de transferrina analisadas até aqui; VI) foi demonstrada a presença de transferrina intracelular nos fotorreceptores, nas células de Müller e nas pequenas células gliais da camada de fibras nervosas, além de outros tipos de neurônios, não identificados, encontrados na retina; vii) os resultados dos experimentos conduzidos neste trabalho sugerem que os fotorreceptores sejam capazes de sintetizar e secretar transferrina; viii) o estudo imunohistoquímico demonstrou, também pela primeira vez, a presença de transferrina na matriz interfotorreceptora
  • Data de criação/publicação: 2002
  • Formato: 87 p.
  • Idioma: Português
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