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Angiotensina II estimula transcrição de NHE3 via receptor AT1 em células OKP

Gabriella Duarte Queiroz Rego Nancy Amaral Rebouças; Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental - FeSBE (23. 2008 Águas de Lindóia); Congresso da Sociedade Brasileira de Biofísica (SBBf) (33. 2008 Águas de Lindóia); Congresso da Sociedade Brasileira de Fisiologia (SBFis) (43. 2008 Águas de Lindóia); Congresso da Sociedade Brasileira de Investigação Clínica (SBIC) (24. 2008 Águas de Lindóia); Congress of the Brazilian Research Association in Vision and Ophthalmology (BRAVO) (5. 2008 Águas de Lindóia)

Programa Águas de Lindóia, 2008

Águas de Lindóia 2008

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  • Título:
    Angiotensina II estimula transcrição de NHE3 via receptor AT1 em células OKP
  • Autor: Gabriella Duarte Queiroz Rego
  • Nancy Amaral Rebouças; Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental - FeSBE (23. 2008 Águas de Lindóia); Congresso da Sociedade Brasileira de Biofísica (SBBf) (33. 2008 Águas de Lindóia); Congresso da Sociedade Brasileira de Fisiologia (SBFis) (43. 2008 Águas de Lindóia); Congresso da Sociedade Brasileira de Investigação Clínica (SBIC) (24. 2008 Águas de Lindóia); Congress of the Brazilian Research Association in Vision and Ophthalmology (BRAVO) (5. 2008 Águas de Lindóia)
  • Assuntos: FISIOLOGIA
  • É parte de: Programa Águas de Lindóia, 2008
  • Descrição: Objetivos Verificar os efeitos da angiotensina II (AII) nas concentrações de 10-7 e 10-10 M sobre a expressão do trocador Na+/H+ (NHE - isoforma 3) em células de túbulos proximais renais. Métodos e resultados Para estudos dos níveis de mRNA de NHE3, células de túbulos proximais de opossum (Didelphis virginiana), OKP, foram tratadas com AII nas concentrações de 10-7 e 10-10 M por 24 horas. O RNA total foi extraído, submetido à transcrição reversa e amplificado por PCR em tempo real. Houve um aumento de 27,3% nos níveis de mRNA no grupo tratado com 10-10 M AII (p < 0,01). O tratamento com Losartan 10-5 M reverteu esse efeito. A pré-incubação das células com 5x10-6 M de Actinomicina D (ActD) não mostrou diferença significativa entre os níveis de mRNA de NHE3 de células tratadas e não tratadas com AII. Para análise da atividade do promotor do gene NHE3 foram realizadas transfecções transitórias em células OKP.Dois fragmentos da região flanqueadora 5' do gene NHE3 de rato, clonados em um vetor com gene repórter (Firifly Luciferase) foram estudados (-2095/+55, -152/+55). A atividade promotora de transcrição do fragmento -152/+55 foi aumentada em 20,5% (p < 0,01) após tratamento por 24 horas com AII na concentração de 10-10 M. Também foram realizados tratamentos com losartan e ActD, nas mesmas condições descritas acima. O tratamento com losartan bloqueou o estímulo gerado pela AII (p < 0,05) e não houve diferença estatística entre a atividade do promotor de células
    tratadas e não tratadas com 10-10 M AII pré-incubadas com ActD. Conclusão O tratamento com AII em baixa concentração estimula a transcrição de NHE3 em células OKP tratadas com este hormônio por 24 horas. Os estudos de transfecção sugerem que há sítios responsivos à AII na região proximal do promotor de NHE3 e que a região distal, que tem elementos inibidores da atividade do promotor, parece mascarar essa resposta. A ação da AII ocorre via receptor AT1 nessas células
  • Editor: Águas de Lindóia
  • Data de criação/publicação: 2008
  • Formato: res. 13.036.
  • Idioma: Português
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