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O papel da fosfolipase D2 na organização e função de complexo de Golgi em mastócitos

Claudia Maria Meirelles Marchini Alves Constance Oliver

2013

Localização: FMRP - Fac. Medicina de Ribeirão Preto    (Alves, Claudia Maria Meirelles Marchini )(Acessar)

  • Título:
    O papel da fosfolipase D2 na organização e função de complexo de Golgi em mastócitos
  • Autor: Claudia Maria Meirelles Marchini Alves
  • Constance Oliver
  • Assuntos: FOSFOLIPASES; MEMBRANAS CELULARES; TRANSPORTE BIOLÓGICO; COMPLEXO DE GOLGI; MASTÓCITOS
  • Notas: Tese (Doutorado)
  • Descrição: A fosfolipase D (PLD) hidrolisa a fosfatidilcolina em ácido fosfatídico e colina. O ácido fosfatídico está relacionado com diversas funções celulares, porém, a função da PLD e a sua localização intracelular variam de acordo com o tipo celular. A PLD possui duas isoformas a PLD1 e a PLD2 que aluam na secreção de mastócitos da linhagem RBL-2H3. 0 objetivo deste estudo foi identificar as possíveis funções da PLD na manutenção da morfologia do Golgi e no tráfego de glicoconjugados para a membrana plasmática, em mastócitos da linhagem RBL-2H3. Células RBL-2H3 que superexpressam PLD2 em sua forma catalítica ativa (PLD2CA) e na forma catalítica inativa (PLD2CI) foram utilizadas. As células PLD2CI apresentaram alterações na estrutura celular e no aparelho de Golgi que apresentou cisternas maiores e dilatadas. Para investigar nestas células o tráfego de glicoconjugados na via secretorabiossintética foi adicionado à cultura o precursor metabólico de ácido siálico. Este precursor contém uma etiqueta azida que é conjugado com um fluoróforo ou biotina, permitindo a identificação de glicanas que contém o ácido siálico. Os resultados mostraram que o ácido siálico é incorporado em glicoconjugados na via secretorabiossintética e está presente no Golgi e em vesículas citoplasmáticas, sendo direcionado para a membrana plasmática. Os dados também mostram que nas células PLD2CI ocorre um atraso no transito do ácido siálico para a membrana plasmática, o que indica que a atividade da PLD2 regula a cinética do ácido siálico na via secretorabiossintética. Assim sendo, em células PLD2CI o ácido siálico permanece por um período mais longo na membrana plasmática. Também demonstramos que o processo de endocitose é mais lento células PLD2CI em relação às outras linhagens, o que pode ser explicado pelo maior tempo de permanência do ácido siálico na membrana plasmática.
    O presente trabalho mostra que, em mastócitos, a PLD2 regula a morfologia do Golgi, modula a incorporação de ácido siálico em glicoconjugados e o tráfego de membranas contendo glicoconjugados, para a membrana plasmática
  • Data de criação/publicação: 2013
  • Formato: 81 p anexos.
  • Idioma: Português
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