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Purificação e caracterização do fator citotóxico vacuolizante (VCF) de Aeromonas veronii biovar sobria e Aeromonas sobria

Luciano Moura Martins Yano Tomomasa

2007

Localização: ICB - Inst. Ciências Biomédicas    (T-ICB BMM QW4 M386pc 2007 )(Acessar)

  • Título:
    Purificação e caracterização do fator citotóxico vacuolizante (VCF) de Aeromonas veronii biovar sobria e Aeromonas sobria
  • Autor: Luciano Moura Martins
  • Yano Tomomasa
  • Assuntos: MICROBIOLOGIA; AEROMONAS; APOPTOSE
  • Notas: Tese (Doutorado)
  • Notas Locais: Microbiologia
  • Descrição: Estudos têm demonstrado atenção ao gênero Aeromonas, devido à infecção no homem. Pesquisas com fatores de virulência têm sido descritos na tentativa de compreender seu mecanismo de ação na patologia humana. Recentemente descrevemos a presença de um fator citotóxico vacuolizante (VCF), produzido principalmente por A. sobria e A. veronii bv. sobria. Neste trabalho as metodologias para a purificação do Fator Citotóxico Vacuolizante (VCF) de Aeromonas veronii bv. sobria, foram determinados assim como foram realizados ensaios biológicos de caracterização da citotoxina purificada, pelas análises de viabilidade celular, determinação da dose citotóxica 50%, verificação da integridade da membrana celular (detecção da enzima LDH) e da atividade mitocondrial (MTT). O VCF é termolábil, sensível à ação da proteinase K e induz um efeito citopático característico de alterações nucleares ao longo do tempo, como mostraram os ensaios com a coloração de Azul de Toluidina. Esta citotoxina causa morte celular por apoptose (determinado pelas reações de Feulgen, TUNEL e análise por citometria de fluxo) e possui atividade caseinolítica, detectada por técnicas de difusão em agar, ensaios de lise da azocaseína e zimografia. As Reações de Polimerase em Cadeia (PCR), conduzidas com as amostras produtoras do VCF, demonstraram que as mesmas não possuem o gene "Vac A" de Helicobacter pylori, assim como apenas duas amostras possuem o gene da "aerolisina". O VCF não possui atividade hemolítica, o que
    diferencia este fator de virulência da enterotoxina citotóxica de Aeromonas
  • Data de criação/publicação: 2007
  • Formato: 71 p. anexos.
  • Idioma: Português
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